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      抗原檢測and核酸檢測你了解多少呢?
      源葉生物 / 2022-04-18

       2022年,新冠歷經3年,本以為已經平息的國內新冠疫情又隨著奧密克戎及其變異株的強傳播性和隱匿性而復燃。同時,全球也正經歷著新冠疫情第四波流行高峰。今年,國家衛健委最新發布了抗原檢測方案,新的新冠檢測方案引起了大家的高度關注。
      目前,上海在全市范圍內,主要通過抗原檢測和核酸檢測相結合的方式進行篩查工作。

       

       

      那么,抗原檢測與傳統的核酸檢測有什么區別呢?都是什么原理呢?

      讓我們來細看一下:

      抗原檢測和核酸檢測的相同點是什么?

      抗原檢測和核酸檢測都屬于體外診斷,是指對人體樣本(血液、體液、組織等)在體外進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。體外診斷主要分為免疫診斷、分子診斷、生化診斷、血液和體液學診斷等方法。不同診斷方法的檢測原理和技術手段不同,應用領域也存在較大差異。

      抗原檢測和核酸檢測的區別是什么?

      抗原檢測和核酸檢測就是兩種不同的技術手段,檢測病毒不同的物質??乖瓩z測通過檢測病毒的特異性蛋白,相當于是病毒穿的外衣;而核酸檢測則是檢測病毒的核酸基因片段,是病毒內的基因。

      抗原檢測的特點:快速、簡便。目前已經推出了多款抗原檢測的試劑盒,不需要專業人員采樣,不需要專門的設備,在家就能自行檢測,一般幾分鐘即可出結果。但是抗原檢測必須要求樣本已經含有大量抗原,出現癥狀5天以內的人群中進行檢測才更準確有效。

      核酸檢測特點:精準。核酸檢測則需要專門的PCR儀,進行病毒基因特異片段的擴增過程,可以將很少量的病毒基因片段擴增至檢測限以上,因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被發現,有助于早期病例的發現。

       

      因此,核酸檢測結果才是目前診斷新冠病毒感染的“金標準”。

      抗原檢測是什么原理?

      新冠抗原檢測采用膠體金的方法,新型冠狀病毒的N蛋白可作為免疫原,在病毒感染人體后,刺激漿細胞產生特異性抗體。依據雙抗夾心ELISA原理,樣本滴加在樣本墊上,通過液相層析依次通過結合墊,NC膜上的檢測線(T線)和質控線(C線)。結合墊內含有標記的抗原特異性抗體,可以與樣本中的抗原(病毒蛋白)發生結合,當液流到達檢測線(T線)時,固定在這條線上的第二種抗原特異性抗體再次與抗原結合,將會呈現陽性結果。質控線(C線)包被IgY抗體,可以結合樣本墊中抗體,用于判斷層析過程是否順利。

       

      核酸檢測是什么原理?

      目前的核酸檢測是通過探針法原理,利用堿基配對的原則,使用熒光探針進行實時跟蹤測定。將帶有標記的已知DNA或者RNA序列作為核酸探針,與待測樣品中互補的序列配對退火形成雙鏈,通過這一核酸雜交的過程,檢測核酸樣品中特定基因序列。每一種病原體都具有獨特的核酸片段或者片段的獨特組合,比如新冠病毒的ORF1ab基因、N基因等。

      新冠病毒的檢測中,使用的就是寡核苷酸引物和探針。目前國家藥品監督管理局批準的幾十個新冠病毒核酸檢測試劑盒中,采用熒光PCR法的占大多數;

      熒光PCR法,目前通常為實時熒光定量PCR,這一技術是普通聚合酶鏈式反應PCR技術的拓展。在原始的PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR放大擴增特定的DNA片段的進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析。

      PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收,無法檢測或只有微弱熒光;PCR擴增時,Taq酶的5'3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,熒光信號大大增強,從而熒光監測系統可接收到信號,每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。擴增出來的基因越多,累計的熒光信號就越強,以此來確定樣本中是否有病毒核酸,也就是確認受檢者是否被感染。

       

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